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广州慧晶生物科技有限公司

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亲和纯化/质谱(AP/MS)
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产品: 浏览次数:2098亲和纯化/质谱(AP/MS) 
品牌: 辉骏生物
规格: 各类载体构建与改造 技术服务
单价: 面议
最小起订量:
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发货期限: 自买家付款之日起 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2019-05-10 10:20
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详细信息

实验目的:寻找靶蛋白的互作蛋白
 

AP/MS服务简介:
        与常规Co-IP实验类似,只是亲和纯化法可不用引入抗体。将标签(如SBP)与特定基因融合表达,融合蛋白用链霉亲和素(strep)磁珠亲和纯化,经生物素洗脱,即可得到蛋白复合物。将实验组和对照组的洗脱蛋白分别做质谱,在实验组结果中扣除对照组中的蛋白,即可鉴定出与靶蛋白互作的蛋白。



AP/MS技术优势:
  1、得到的互作蛋白是细胞内与诱饵蛋白天然互作的,符合体内真实生理情况,可信度高;
  2、不用抗体“拉取”互作蛋白复合物,避免了抗体的污染;
  3、所得洗脱液可直接酶解,进行质谱,减少了跑胶引起的蛋白损失。



服务内容:
  1、构建含SBP标签的靶基因表达载体质粒;
  2、目的细胞中过表达带标签的诱饵蛋白,细胞裂解液做WB检测表达效果;
  3、用strep微珠进行蛋白复合物的纯化和洗脱;
  4、实验组和对照组的洗脱液分别用胰酶酶解;
  5、LC-MS/MS,获得蛋白质的定性信息;
  6、结果分析与报告整理。



技术流程图:


服务项目 客户提供 结果交付 实验周期
AP/MS 1、诱饵基因的名称、序列、物种等相关信息或诱饵基因的cDNA模板等
2、待研究的细胞(保证细胞状态良好,易于用质粒转染)及其培养相关信息
1、构建好的真核表达载体
2、实验组和对照组蛋白的质谱鉴定结果
3、数据分析结果
预计2-2.5个月
 
 
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